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目前國內標準胎牛血清的主要指標有以下幾點:
1、內毒素 標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清質量也未見影響??梢?,內毒素含量偏高不影響質量,除非含量*,預示著已經污染。
2、總蛋白含量 胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。
3、血紅蛋白 標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。
4、pH 國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。
5、微生物 包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經過0.1um過濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產環境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清除,但對血清質量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。
6、免疫球蛋白 國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出采血的時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。
7、其它 不管是國產還是進口血清,都是不測抗生素的(無四環素標準胎牛血清除外)。國外,抗生素的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內,抗生素的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養極為不利,這是國產血清質量差的根本原因。
血源
市場上的標準胎牛血清血源血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。
1、國產血清,國內環境污染嚴重,同時飼養過程中抗生素極其濫用,有毒有害物質會大量殘留在血清中,zui終不利于細胞的生長。
2、南美血清,來源很多,如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等,這些血清由于采血的不可控性,質量參差不齊,當然,相對于國內血清來說好的多。另外,國內銷售的南美血清大多顏色鮮紅,如Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,這可能和各國的采血、生產工藝有關。
3、北美血清,主要來自美國和加拿大,如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類血清,等級越高的顏色越淡,表現為淡黃中帶一點微紅,SH30070和SH30396對比就很明顯,特級胎牛血清基本就能進行干細胞培養。北美血清還有一個顯著特點就是每瓶血清都能溯源,這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要。
4、澳洲血清,來源主要是新西蘭和澳大利亞,這是在北美血清禁運之后進入中國市場的,一般不具有溯源功能,由于生產、運輸等原因,價格相對來說比較貴。拿Gibco的10099和16000相比較,后者質量等級更高,顏色更淡,性價比更高。
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